Plataforma de Citometría
Se caracteriza por disponer de una Cartera de Servicio referente a nivel nacional para la Inmunofenotipificación de linfomas y leucemias en animales de experimentación.
Esta Plataforma cuenta con un citómetro versátil y actualizado, con una configuración de adquisición y análisis de 18 parámetros (FSC/SSC y 16 fluorescencias de forma simultánea). Por otro lado, dispone de un sistema de separación celular altamente eficiente (Cell Sorting), capaz de separar 4 poblaciones celulares altamente puras de forma simultánea, incluyendo la separación de célula única (single cell) en distintos soportes. Todo ello permite identificar de forma precisa las células de interés y los parámetros que presentan en cuanto a intensidades de fluorescencias y tamaño/complejidad (Index Sort).
Ubicada en la 1ª Planta Edificio Gerencia Antiguo Hospital San Cecilio, Avd. Madrid s.n de Granada.
Existen dos modalidades de prestación de servicios:
- Uso de los equipos, en autoservicio o con apoyo del Técnico Responsable. Debido a la complejidad de uso de estos equipos, el investigador debe de aportar certificación de conocimiento del mismo. El coste del uso de los equipos viene especificado en el documento “Tarifas”.
- Realización de Técnicas Específicas por parte de los Técnicos Responsables. El coste de estas técnicas es bajo presupuesto, ya que depende de la complejidad de las mismas y del número de muestras a realizar.
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- CF_01 - Cuantificación de citoquinas, proteínas de señalización celular, solubles e inmunoglobulinas mediante Citometría de Flujo. Método CBA
- CF_02 - Inmunofenotipificación de linfomas y leucemias en animales de experimentación por citometría de flujo
- CF_03 - Caracterización y aislamiento de Cancer Stem Cells por citometría de flujo
- CF_04 - Determinación cualitativa y cuantitativa de daños en el ADN mediante citometría de flujo
- CF_05 - Caracterización de poblaciones y subpoblaciones linfocitarias mediante citometría de flujo
- CF-06 Estudios de apoptosis celular por citometría de flujo (Anexina V)
- CF_07- Análisis del ciclo celular mediante la determinación de la fase celular por Citometría de Flujo
- CF-08 Evaluación de la expresión de cadenas ligeras kappa/lambda en linfomas b por citometría de flujo
- CF_09- Caracterización y aislamiento de Cancer Stem Cells en función de su actividad Aldh-1 y AldeRed por Citometría de Flujo
- CF_10- Estudio de la producción de especies reactivas en leucocitos por citometría de flujo
Citómetro de flujo FACS ARIA III actualizado: con 4 líneas de láser y 16 de detectores de fluorescencia (18 parámetros simultáneos):
- Láser Violeta (405 nm), equipado con 7 detectores de fluorescencia
- Láser Azul (488nm), permite detectar 2 fluorescencias y los parámetros morfométricos FSC/SSC
- Láser amarillo/verde (561 nm), cuenta con 4 detectores de fluorescencia
- Láser rojo (633nm), equipado con 3 detectores de fluorescencia
Con sistema de separación celular (hasta 4 poblaciones) y la unidad de Clonaje/célula Única (automatic cell deposition unit) que permite la deposición de una o más células en placas multipocillo, portaobjetos y tubos desde 0,5 hasta 15 mL (sistema Index Sort).
Todo ello con el software de adquisición y análisis DIVA 8
Citómetro espectral Cytek Northern Lights: Este equipo consta de 3 líneas láseres y un total de 38 detectores:
- Láser Violeta (405 nm) con 16 detectores para este láser.
- Láser Azul (488 nm) con 14 detectores:
- Laser rojo (638nm) con 8 detectores.
Lo que permite detectar hasta 38 parámetros de manera simultánea.
Los detectores son fotodiodos de avalancha (APD) de alta eficiencia cuántica.
Pueden utilizarse una gran cantidad de fluorocromos a la vez, ya que cubre el espectro desde los 420 hasta los 829 nm.
Cuenta con tres canales de dispersión de la luz, uno de dispersión hacia delante (Forward Scatter, FSC) y dos de dispersión lateral (Side Scatter, SSC):
- FSC: detector de alto rendimiento con un filtro de paso de banda de 488 nm.
- SSC Violeta: detector de alto rendimiento con un filtro de paso de banda de 405 nm.
- SSC Azul: detector de alto rendimiento con un filtro de paso de banda de 488 nm.
El equipo cuenta con una estación de trabajo equipada con el Software SpectroFlow, para la adquisición y análisis de datos.
